dATP (2'-desoxyadenosine-5'-trifosfaat) is een purine-desoxyribonucleotide en een van de vier fundamentele bouwstenen die nodig zijn voor DNA-synthese. Het bestaat uit de nucleobase adanine, verbonden aan een desoxyribose-suiker en een keten van drie fosfaatgroepen op de 5'-positie. Tijdens DNA-replicatie wordt dATP geïntegreerd in groeiende DNA-strengen door DNA-polymerasen, waar het specifiek paart met thymidine (dTTP) via complementaire basenparing. Als essentieel celmetabolit is dATP bewaard gebleven in een breed scala aan organismen, van bacteriën tot zoogdieren.

Biologische functies en regulatie

dATP fungeert als de primaire adenine-nucleotide-donor tijdens DNA-replicatie en -reparatie. Het wordt intracellulair gesynthetiseerd uit adenosinedifosfaat (ADP) via strak gereguleerde enzymatische paden die gebalanceerde desoxynucleotide-poelen handhaven. In de moleculaire biologie is dATP een onmisbare component van PCR, DNA-sequencing, moleculaire klonering en talloze enzymatische DNA-amplificatietechnieken. Een hoge reagenszuiverheid is essentieel, omdat verontreinigingen zoals gemodificeerde nucleotiden of pyrofosfaat DNA-polymerasen kunnen remmen en de amplificatie-efficiëntie kunnen aantasten, met name bij real-time PCR- en long-range PCR-toepassingen. Standaard PCR-reacties gebruiken doorgaans een eindconcentratie van ongeveer 0,2 mM voor elk desoxynucleotide.

Onderzoeksapplicaties en voordelen

• DNA-synthese: Verschaft het adenine-nucleotide dat nodig is voor DNA-replicatie, -reparatie en enzymatische amplificatiereacties.
• Moleculair-biologische werkstromen: Wordt veel gebruikt in PCR, kwantitatieve PCR, DNA-sequencing, klonering en andere nucleïnezuur-amplificatietechnieken die nucleotiden van hoge zuiverheid vereisen.
• Labelen met gemodificeerde nucleotiden: Gefunctionaliseerde derivaten zoals Biotin-11-dATP maken niet-radioactieve labeling van DNA-sondes mogelijk voor toepassingen zoals fluorescentie-in-situ-hybridisatie (FISH), Southern blotting en streptavidine-gebaseerde detectiesystemen.
• Formuleringen van hoge kwaliteit: Beschikbaar in sterk gezuiverde (≥99%) 10 mM- en 100 mM-oplossingen om reproduceerbare prestaties en langdurige stabiliteit te garanderen bij opslag bij -20 °C.