Mieloperossidasi (MPO) è un enzima contenente eme, trovato prevalentemente nei leucociti polimorfonucleati (neutrofili) e monociti. Gioca un ruolo cruciale nell'immunità innata catalizzando la formazione di ossidanti reattivi, principalmente acido ipocloroso (HOCl), da perossido di idrogeno e ioni cloruro. Questa attività enzimatica è centrale nella funzione microbicida delle cellule immunitarie e influenza varie vie metaboliche e infiammatorie.
Ruolo della MPO nel metabolismo
- MPO catalizza la conversione di perossido di idrogeno (H₂O₂) e ioni cloruro (Cl⁻) in acido ipocloroso (HOCl): un potente ossidante che contribuisce all'eliminazione dei patogeni.
- Oltre la difesa dell'ospite: L'ossidazione mediata dalla MPO modifica biomolecole come le lipoproteine a bassa densità (LDL), formando LDL ossidate dalla MPO (Mox-LDL), implicate nell'infiammazione vascolare e nell'aterosclerosi.
- L'attività MPO influenza lo stress ossidativo e la segnalazione infiammatoria: collegandola a malattie metaboliche e danni vascolari.
Principio dei kit di attività MPO
I kit di assaggio MPO forniscono una misurazione quantitativa dell'attività enzimatica MPO in campioni biologici come lisati cellulari, estratti di tessuti, siero, plasma e fluidi corporei. Vengono utilizzati due metodi comuni di rilevamento:
- Prove colorimetriche: Queste dipendono dalla catalisi da parte della MPO dell'ossidazione dei substrati (ad esempio, o-dianisidina o sonde cromogeniche) in presenza di H₂O₂, producendo un prodotto colorato misurabile per assorbanza. L'intensità del colore è correlata con l'attività MPO.
- Prove fluorometriche: Queste rilevano l'attività MPO attraverso substrati fluorescenti che emettono luce quando ossidati dalla MPO, offrendo maggiore sensibilità e adeguatezza per screening ad alta capacità.
Caratteristiche principali dei kit di attività MPO
- Alta sensibilità: limiti di rilevamento fino a 0,05 mU per pozzetto.
- Versatilità: applicabile a vari tipi di campioni, inclusi siero umano, plasma, omogenati di tessuti e lisati cellulari.
- Quantitativo: consente di determinare le unità di attività MPO, facilitando i confronti tra campioni.
- Uso ampio: in ricerche su infiammazione, stress ossidativo, malattie cardiovascolari e risposta immunitaria.
Rilevanza biologica e clinica
HOCl generato dalla MPO e le specie reattive correlate contribuiscono all'eliminazione dei patogeni ma causano anche modifiche ossidative nei tessuti dell'ospite. L'attività MPO è associata a:
- Malattie infiammatorie: come l'aterosclerosi, dove il LDL modificato dalla MPO favorisce la disfunzione endoteliale e la formazione di placche.
- Danno tissutale legato allo stress ossidativo.
- Potenziale biomarcatore: per il rischio cardiovascolare e come bersaglio terapeutico.
I kit di test MPO consentono una quantificazione precisa dell'attività MPO, un enzima fondamentale che collega il metabolismo immunitario e lo stress ossidativo. Il loro utilizzo avanza nella comprensione del ruolo della MPO nella salute e nella malattia, in particolare nell'infiammazione e nella patologia vascolare.