Mieloperoxidase (MPO) é uma enzima contendo heme, encontrada predominantemente em leucócitos polimorfonucleares (neutrófilos) e monócitos. Ela desempenha um papel crucial na imunidade inata, catalisando a formação de oxidantes reativos, principalmente ácido hipocloroso (HOCl), a partir de peróxido de hidrogênio e íons cloreto. Esta atividade enzimática é central para a função microbicida das células imunes e influencia várias vias metabólicas e inflamatórias.
Papel da MPO no Metabolismo
- A MPO catalisa a conversão de peróxido de hidrogênio (H₂O₂) e íons cloreto (Cl⁻) em ácido hipocloroso (HOCl): um potente oxidante que contribui para a eliminação de patógenos.
- Além da defesa do hospedeiro: A oxidação mediada pela MPO modifica biomoléculas como lipoproteínas de baixa densidade (LDL), formando LDL oxidadas pela MPO (Mox-LDL), que está implicada na inflamação vascular e aterosclerose.
- A atividade da MPO influencia o estresse oxidativo e a sinalização inflamatória: associando-a a doenças metabólicas e danos vasculares.
Princípio dos Kits de Ensaios de Atividade MPO
Os kits de ensaio MPO fornecem a medição quantitativa da atividade enzimática da MPO em amostras biológicas, como lisados celulares, extratos de tecidos, soro, plasma e fluidos corporais. São utilizados dois métodos comuns de detecção:
- Ensaios colorimétricos: Estes dependem da MPO para catalisar a oxidação de substratos (por exemplo, o-dianisidina ou sondas cromogênicas) na presença de H₂O₂, produzindo um produto colorido que pode ser medido por absorção. A intensidade da cor está correlacionada com a atividade da MPO.
- Ensaios fluorométricos: Estes detectam a atividade da MPO através de substratos fluorescentes que emitem luz quando são oxidados pela MPO, oferecendo maior sensibilidade e adequação para triagens de alto rendimento.
Principais Características dos Kits de Ensaios MPO
- Alta sensibilidade: limites de detecção tão baixos quanto 0,05 mU por poço.
- Versatilidade: aplicável a vários tipos de amostras, incluindo soro humano, plasma, homogeneizados de tecidos e lisados celulares.
- Quantitativo: permite determinar as unidades de atividade da MPO, facilitando comparações entre amostras.
- Amplamente utilizado: em pesquisas sobre inflamação, estresse oxidativo, doenças cardiovasculares e resposta imune.
Relevância Biológica e Clínica
O HOCl gerado pela MPO e as espécies reativas relacionadas contribuem para a eliminação de patógenos, mas também causam modificações oxidativas nos tecidos do hospedeiro. A atividade da MPO está associada a:
- Doenças inflamatórias: como aterosclerose, onde o LDL modificado pela MPO promove disfunção endotelial e formação de placas.
- Dano tecidual relacionado ao estresse oxidativo.
- Possível biomarcador: para risco cardiovascular e alvo terapêutico.
Os kits de ensaio MPO permitem a quantificação precisa da atividade da MPO, uma enzima fundamental que conecta o metabolismo imune e o estresse oxidativo. Sua aplicação avança na compreensão do papel da MPO na saúde e doença, particularmente em inflamação e patologia vascular.