Anticorpos secundários com absorção cruzada

Anticorpos secundários com absorção cruzada

Os anticorpos secundários de adsorção cruzada são anticorpos policlonais que foram submetidos a uma etapa de purificação adicional denominada adsorção cruzada para filtrar os membros que se ligam a espécies de imunoglobulinas (IgG) não visadas. 

A adsorção cruzada é um processo que envolve o isolamento dos anticorpos do antissoro através da ligação a proteínas alvo que foram imobilizadas em géis de fase sólida. Os géis utilizados para a adsorção cruzada podem conter proteínas de diferentes espécies, diferentes subclasses de IgG de ratinho ou diferentes fragmentos de anticorpos. Os anticorpos secundários de adsorção cruzada apresentam uma reatividade cruzada mínima com essas espécies, quer sejam apresentadas pelos anticorpos experimentais ou por proteínas endógenas na amostra. A pré-adsorção, que é outro termo para a adsorção cruzada, é uma etapa de purificação adicional introduzida para aumentar a especificidade de um anticorpo secundário. 

Os anticorpos secundários de adsorção cruzada são recomendados para evitar a deteção de imunoglobulinas que não são o alvo pretendido em muitas imunotécnicas que requerem anticorpos de várias espécies no sistema de ensaio, como ELISA, citometria de fluxo ou IHC. Pode conseguir-se uma adsorção cruzada eficaz utilizando uma concentração elevada de antigénio imobilizado e um tempo de incubação longo.