Geadsorbeerde secundaire antilichamen

Geadsorbeerde secundaire antilichamen

Cross-adsorbed secundaire antilichamen zijn polyklonale antilichamen die een extra zuiveringsstap, kruisadsorptie genaamd, hebben ondergaan om leden die zich binden aan off-target soorten immunoglobulinen (IgG) eruit te filteren. 

Kruisadsorptie is een proces waarbij de antilichamen uit het antiserum worden geïsoleerd door binding aan doeleiwitten die zijn geïmmobiliseerd op vaste-fase-gels. De gels die voor kruisadsorptie worden gebruikt, kunnen eiwitten van verschillende soorten, verschillende IgG-subklassen van muizen of verschillende antilichaamfragmenten bevatten. Gekruiste geadsorbeerde secundaire antilichamen vertonen minimale kruisreactiviteit met die soorten, of ze nu aanwezig zijn door de experimentele antilichamen of door endogene eiwitten in het monster. Preadsorptie, een andere term voor kruisadsorptie, is een extra zuiveringsstap die wordt geïntroduceerd om de specificiteit van een secundair antilichaam te verhogen. 

Kruisadsorptie van secundaire antilichamen wordt aanbevolen om detectie te voorkomen van immunoglobulinen die niet het beoogde doel zijn in veel immunotechnieken die antilichamen van meerdere soorten in het assaysysteem vereisen, zoals ELISA, flowcytometrie of IHC. Efficiënte kruisadsorptie kan worden bereikt door een hoge concentratie geïmmobiliseerd antigeen en een lange incubatietijd te gebruiken.