De hexokinase-activiteitsassay is een cruciale biochemische techniek die wordt gebruikt om de activiteit van hexokinase te meten, een enzym dat de fosforylatie van glucose naar glucose-6-fosfaat katalyseert, een sleutelstap in de glycolyse.

Deze assay maakt meestal gebruik van een gekoppelde enzymatische reactie die de glucose-6-fosfaatdehydrogenase (G6PDH) en het co-enzym NAD+ omvat. Het proces begint met de omzetting van glucose naar glucose-6-fosfaat door hexokinase, waarbij tegelijkertijd ATP wordt omgezet in ADP. Het geproduceerde glucose-6-fosfaat wordt vervolgens geoxideerd door G6PDH, wat resulteert in de reductie van NAD+ naar NADH. De toename van NADH kan kwantitatief worden gemeten met behulp van spectrofotometrie bij 340 nm, wat een directe beoordeling van de hexokinase-activiteit mogelijk maakt.

De assay is gevoelig en kan worden uitgevoerd op verschillende monster soorten, waaronder weefselhomogenaten en celextracten, waardoor het waardevol is voor zowel klinische diagnostiek als onderzoeksdoeleinden. Het is vooral nuttig in studies met betrekking tot metabole ziekten, kankerstofwisseling en de effecten van farmaceutische stoffen op glycolytische pathways. Door de activiteit van hexokinase te meten, kunnen onderzoekers inzicht krijgen in de cellulaire energiehuishouding en de regulatorische mechanismen die de glycolyse aansteken, wat bijdraagt aan een beter begrip van metabole stoornissen en potentiële therapeutische doelen.