Un fluorometro è uno strumento sofisticato progettato per misurare la fluorescenza emessa da un campione dopo che è stato eccitato da una specifica lunghezza d'onda della luce. Questo dispositivo è cruciale in vari campi scientifici, tra cui biochimica, monitoraggio ambientale e diagnostica medica, dove aiuta a quantificare la presenza e la concentrazione di molecole fluorescenti, conosciute come fluorofori.

Principio di funzionamento

La fluorescenza si verifica quando una sostanza assorbe luce a una lunghezza d'onda e la riemette a una lunghezza d'onda più lunga. Un fluorometro generalmente è composto da diversi componenti principali:

• Fonte di luce: Spesso una lampada al xenon o un laser che fornisce la luce di eccitazione.
• Monocromatori o filtri: Questi selezionano le lunghezze d'onda specifiche della luce utilizzate per l'eccitazione e l'emissione. I fluorometri a filtro utilizzano filtri ottici, mentre gli spettrofluorometri impiegano monocromatori per una maggiore flessibilità nella selezione delle lunghezze d'onda.
• Supporto per il campione (Cuvetta): Questo è il luogo in cui il campione viene posizionato per l'analisi. Deve essere realizzato con materiali che non fluorescano alle lunghezze d'onda utilizzate.
• Rilevatore: Comunemente un tubo fotomoltiplicatore (PMT) o un dispositivo a accoppiamento di carica (CCD), che misura l'intensità della fluorescenza emessa.

Tipi di fluorometri

Esistono due principali tipi di fluorometri:

• Fluorometri a filtro: Questi sono generalmente meno costosi e utilizzano filtri ottici fissi per selezionare le lunghezze d'onda di eccitazione e emissione. Sono più semplici, ma offrono minore sensibilità e risoluzione rispetto agli spettrofluorometri.
• Spettrofluorometri: Questi utilizzano monocromatori per selezionare le lunghezze d'onda, consentendo una maggiore flessibilità e sensibilità. Possono essere tarati su un ampio intervallo di lunghezze d'onda, rendendoli adatti ad analisi più complesse.

Applicazioni

I fluorometri sono ampiamente utilizzati in:

• Ricerca biologica: Per quantificare acidi nucleici e proteine in campioni, spesso a concentrazioni molto basse (fino a parti per trilione).
• Monitoraggio ambientale: Per rilevare inquinanti o monitorare processi biologici negli ecosistemi.
• Diagnostica medica: In saggi che richiedono alta sensibilità per rilevare biomolecole specifiche.
• Applicazioni industriali: