La colorazione con Calcofluor White (Fluorescent Brightener 28) è un brillante fluorescente ampiamente utilizzato nella ricerca nelle scienze della vita per la visualizzazione rapida di polisaccaridi con legami β, in particolare chitina, cellulosa e altri β-glucani. Dopo il legame non covalente a questi polisaccaridi strutturali, il colorante emette una brillante fluorescenza blu sotto eccitazione UV o violetta, rendendolo una colorazione fluorescente ampiamente impiegata per la microscopia a fluorescenza e l'imaging confocale. Sebbene sia ampiamente utilizzato per la colorazione delle pareti cellulari fungine, il Calcofluor White è impiegato anche in biologia vegetale, microbiologia, ricerca sulle pareti cellulari e glicobiologia per indagare l'architettura della parete cellulare, la morfogenesi, la citochinesi e la distribuzione dei polisaccaridi. Poiché il colorante si lega a più polisaccaridi con legami β, è altamente sensibile, ma non deve essere considerato specifico per la chitina o per un singolo polisaccaride. Il suo protocollo di colorazione rapida e la compatibilità con campioni fissati, nonché con campioni vivi di funghi e piante opportunamente ottimizzati, hanno stabilito il Calcofluor White come fluorocromo standard per la visualizzazione qualitativa delle pareti cellulari nei laboratori di ricerca.
Caratteristiche principali
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Colorazione fluorescente ad alta sensibilità: Etichetta rapidamente i polisaccaridi con legami β, tra cui chitina, cellulosa e altri β-glucani.
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Fluorescenza ad alto contrasto: Produce una brillante fluorescenza blu dopo eccitazione UV o a 405 nm, consentendo imaging a fluorescenza ad alto contrasto.
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Compatibilità di imaging versatile: Compatibile con microscopia a fluorescenza a campo ampio, microscopia confocale ed esperimenti di imaging di cellule vive opportunamente ottimizzati.
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Protocollo di colorazione rapida: Richiede una preparazione minima del campione, consentendo una visualizzazione qualitativa efficiente dei polisaccaridi della parete cellulare.
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Ampia compatibilità dei campioni: Adatto per funghi, lieviti, piante, alghe, oomiceti e altri campioni contenenti polisaccaridi con legami β.
Tipiche applicazioni di ricerca
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Colorazione fluorescente delle pareti cellulari fungine per studi di morfologia, crescita e differenziazione fungina.
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Analisi della gemmazione dei lieviti, formazione del setto, citochinesi e organizzazione della parete cellulare.
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Visualizzazione delle pareti cellulari vegetali, dei tessuti ricchi di cellulosa e dell'architettura della parete cellulare.
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Indagine sulla biosintesi della parete cellulare, sul rimodellamento e sulla distribuzione spaziale dei polisaccaridi con legami β.
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Imaging basato sulla fluorescenza in microbiologia, micologia, biologia vegetale, glicobiologia e ricerca sulle pareti cellulari.

