La DNMT3A recombinante est la principale ADN méthyltransférase de novo utilisée pour étudier la régulation épigénétique, l'établissement des profils de méthylation de l'ADN, l'activité enzymatique ainsi que l'identification d'inhibiteurs. Disponible sous forme de protéine pleine longueur ou de domaines fonctionnels isolés, la DNMT3A recombinante constitue un outil de référence pour les études biochimiques, structurales et des interactions avec la chromatine, tout en offrant une plateforme fiable pour comprendre les mécanismes de régulation de l'expression génique dépendants de la méthylation.
Systèmes d'expression et contrôle qualité
Les protéines de pleine longueur sont généralement exprimées dans des cellules d'insectes ou de mammifères afin de préserver leur repliement natif et leurs modifications post-traductionnelles, tandis que les domaines isolés sont le plus souvent produits dans Escherichia coli. La qualité des produits est évaluée par des contrôles de pureté, la confirmation de la séquence, la mesure de l'activité enzymatique, la caractérisation de l'état oligomérique, le dosage des endotoxines ainsi que la validation des conditions optimales de stockage.
Applications de recherche
- Études épigénétiques : Analyse de la méthylation de l'ADN et de la régulation de la chromatine.
- Découverte de médicaments : Essais d'activité des ADN méthyltransférases et criblage d'inhibiteurs.
- Biologie structurale : Études par cryomicroscopie électronique (cryo-EM), cristallographie aux rayons X et analyse des interactions protéiques.
- Essais biophysiques : Études des interactions avec l'ADN, les histones et la DNMT3L à l'aide de techniques telles que la résonance plasmonique de surface (SPR), la calorimétrie de titration isotherme (ITC) et les méthodes basées sur la fluorescence.
