RT-PCR quantitative - qRT-PCR

RT-PCR quantitative - qRT-PCR


La RT-qPCR est une technique qui permet de faire une PCR (réaction en chaîne par polymérase) quantitative à partir d'un échantillon d'ARN. L'ARN est tout d'abord rétrotranscrit grâce à une enzyme appelée transcriptase inverse, qui permet la synthèse de l'ADN complémentaire (ADNc). Ce dernier est ensuite utilisé pour réaliser une PCR quantitative. La transcriptase inverse ou rétrotranscriptase (en anglais reverse transcriptase ou encore RT) est une enzyme utilisée par les rétrovirus et les rétrotransposons qui transcrivent l'information génétique des virus ou rétrotransposons de l'ARN en ADN, qui peut s'intégrer dans le génome de l'hôte.

La RT-qPCR a été mise au point pour utiliser les ARN comme matrice d'amplification de la PCR quantitative. Elle est certainement la méthode la plus sensible pour détecter et quantifier, les ARN messagers au niveau d'un organe, d'un tissu ou d'une cellule.Elle est également utilisée pour la construction de banques d'ADNc, le tri d'ARNm (Differencial Display RT-PCR) ainsi que la construction de sondes d'ADN.

La PCR quantitative ou qPCR ou PCR en temps réel, est une méthode particulière de réaction en chaîne par polymérase permettant de mesurer la quantité initiale d'ADN. En réalité, la PCR quantitative mesure le nombre d'amplicon (portion d'ADN définie par un couple d'amorces).
Elle permet de suivre en continu (« en temps réel ») le processus d'amplification PCR en détectant la fluorescence émise par les produits de PCR néo formés.

Le profil d'une réaction PCR quantitative classique peut se décomposer en 3 étapes :
  • une première étape dite de bruit de fond : la quantité de fragment amplifié est insuffisante pour générer un signal fluorescent supérieur au bruit de fond (et donc la fluorescence générée). 
  • une seconde étape de phase exponentielle de croissance : la quantité de fragment amplifié génère un signal fluorescent supérieur au seuil de détection de l'appareil, puis le nombre de produits amplifié double à chaque cycle. En coordonnées logarithmiques, cette phase est représentée par une droite.
  • une dernière étape de phase de plateau : certains composants de la réaction (et en particulier le nombre de molécules de Taq disponibles) deviennent limitants. Le système ne permet plus une amplification exponentielle.

La détection peut se faire à l'aide de SYBR green, composé organique fluorescent qui se lie aux acides nucléiques, ou de sondes, Taqman ou FRET.

Foire aux questions (FAQ)

Où trouver les produits qrt-pcr sur le site de Neo Biotech ?

Les produits qrt-pcr sont disponibles dans cette rubrique et peuvent être classés par familles ou sous-catégories, comme Mix SYBR Green pour RT-qPCR, Mix pour sondes pour RT-qPCR. Vous pouvez parcourir l'arborescence du catalogue ou utiliser la barre de recherche avec un nom de produit, une référence catalogue, une marque, ou un fournisseur.

Quels types de produits sont disponibles dans la catégorie qrt-pcr ?

La catégorie qrt-pcr regroupe différentes références de produits, consommables, réactifs, kits, instruments ou solutions de laboratoire selon la famille concernée. Les sous-catégories Mix pour sondes pour RT-qPCR, Mix SYBR Green pour RT-qPCR permettent d'accéder plus rapidement aux produits correspondant à votre besoin.

Comment trouver rapidement un produit qrt-pcr ?

Pour trouver un produit qrt-pcr, utilisez la recherche par nom, référence, fournisseur, marque ou sous-catégorie. Vous pouvez également naviguer dans les familles de produits proposées sur la page afin d'identifier une référence disponible, une alternative ou un produit équivalent.

Neo Biotech distribue-t-il plusieurs références dans la catégorie qrt-pcr ?

Oui, Neo Biotech distribue plusieurs références dans la catégorie qrt-pcr, issues de fournisseurs spécialisés. Selon la famille de produits, les références peuvent varier par format, conditionnement, marque, fournisseur, caractéristiques techniques ou disponibilité.

Peut-on demander un devis pour les produits qrt-pcr ?

Oui, vous pouvez demander un devis pour les produits qrt-pcr depuis la page produit ou en contactant Neo Biotech (info@neo-biotech.com). Pour faciliter le traitement de votre demande, indiquez si possible le nom du produit, la référence catalogue, la quantité souhaitée, le fournisseur ou la marque recherchée, ainsi que le pays de livraison.

Comment savoir si un produit qrt-pcr est disponible à la commande ?

La disponibilité d'un produit qrt-pcr dépend de la référence, du fournisseur, du conditionnement et du pays de livraison. Pour obtenir une information actualisée, consultez la fiche produit ou contactez Neo Biotech avec la référence ou le nom du produit recherché.

Que faire si je ne trouve pas le produit qrt-pcr recherché ?

Si le produit qrt-pcr recherché n'apparaît pas dans le catalogue, contactez Neo Biotech avec les informations disponibles : nom du produit, référence, fournisseur, marque, format ou conditionnement. L'équipe pourra rechercher la référence dans son réseau de fournisseurs ou proposer une alternative disponible.

Les produits qrt-pcr sont-ils tous disponibles dans les mêmes conditions ?

Non. Les conditions de commande, de livraison, de stockage ou de documentation peuvent varier selon le type de produit, le fournisseur et la réglementation applicable. Certaines références peuvent nécessiter une validation spécifique, un transport adapté, une fiche de sécurité ou des informations complémentaires avant commande.