El ensayo de actividad de hexoquinasa es una técnica bioquímica crucial utilizada para medir la actividad de la hexoquinasa, una enzima que cataliza la fosforilación de glucosa a glucosa-6-fosfato, un paso clave en la glucólisis.

Este ensayo generalmente emplea una reacción enzimática acoplada que involucra la glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PDH) y el coenzima NAD+. El proceso comienza con la conversión de glucosa en glucosa-6-fosfato por la hexoquinasa, lo que a su vez convierte ATP en ADP. El glucosa-6-fosfato producido es luego oxidado por G6PDH, lo que resulta en la reducción de NAD+ a NADH. El aumento de NADH puede medirse cuantitativamente por espectrofotometría a 340 nm, proporcionando una evaluación directa de la actividad de hexoquinasa.

El ensayo es sensible y se puede realizar con varios tipos de muestras, incluyendo homogenizados de tejido y extractos celulares, lo que lo hace valioso tanto para diagnósticos clínicos como para aplicaciones en investigación. Es particularmente útil en estudios relacionados con enfermedades metabólicas, el metabolismo del cáncer y los efectos de los fármacos sobre las vías glucolíticas. Al medir la actividad de la hexoquinasa, los investigadores pueden obtener información sobre el metabolismo energético celular y los mecanismos regulatorios que gobiernan la glucólisis, contribuyendo así a una mejor comprensión de los trastornos metabólicos y los posibles objetivos terapéuticos.