Myeloperoxidase (MPO) ist ein hämmhaltiges Enzym, das überwiegend in polymorphkernigen Leukozyten (Neutrophilen) und Monozyten vorkommt. Es spielt eine entscheidende Rolle in der angeborenen Immunität, indem es die Bildung reaktiver Oxidantien, hauptsächlich Hypochlorige Säure (HOCl), aus Wasserstoffperoxid und Chloridionen katalysiert. Diese enzymatische Aktivität ist zentral für die mikrobizide Funktion von Immunzellen und beeinflusst verschiedene Stoffwechsel- und Entzündungspfade.
Rolle von MPO im Metabolismus
- MPO katalysiert die Umwandlung von Wasserstoffperoxid (H₂O₂) und Chloridionen (Cl⁻) zu Hypochloriger Säure (HOCl): einem starken Oxidationsmittel, das zur Abtötung von Krankheitserregern beiträgt.
- Über die Abwehr des Wirts hinaus: Die durch MPO vermittelte Oxidation verändert Biomoleküle wie Low-Density-Lipoproteine (LDL), wodurch MPO-oxidiertes LDL (Mox-LDL) gebildet wird, das an der Entzündung der Gefäße und Atherosklerose beteiligt ist.
- MPO-Aktivität beeinflusst oxidativen Stress und entzündliche Signalübertragung: und verknüpft sie mit Stoffwechselkrankheiten und Gefäßschäden.
Prinzip der MPO-Aktivitätsassay-Kits
MPO-Assay-Kits ermöglichen die quantitative Messung der MPO-enzymatischen Aktivität in biologischen Proben wie Zelllysaten, Gewebeextrakten, Serum, Plasma und Körperflüssigkeiten. Zwei gängige Nachweismethoden werden verwendet:
- Colorimetrische Assays: Diese basieren darauf, dass MPO die Oxidation von Substraten (z. B. o-Dianisidin oder chromogene Sonden) in Gegenwart von H₂O₂ katalysiert und ein farbiges Produkt erzeugt, das durch Absorption messbar ist. Die Intensität der Farbe korreliert mit der MPO-Aktivität.
- Fluorometrische Assays: Diese erkennen die MPO-Aktivität durch fluoreszierende Substrate, die bei der MPO-katalysierten Oxidation Licht aussenden und somit eine erhöhte Sensitivität und Eignung für Hochdurchsatz-Screening bieten.
Hauptmerkmale der MPO-Assay-Kits
- Hohe Sensitivität: Nachweisgrenzen von nur 0,05 mU pro Well.
- Vielseitigkeit: Anwendbar auf verschiedene Probentypen wie menschliches Serum, Plasma, Gewebehomogenate und Zelllysate.
- Quantitativ: Ermöglicht die Bestimmung von MPO-Aktivitätseinheiten und erleichtert Vergleiche zwischen Proben.
- Weit verbreitet: In der Forschung zu Entzündungen, oxidativem Stress, Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Immunantwort.
Biologische und klinische Relevanz
MPO-generiertes HOCl und verwandte reaktive Spezies tragen zur Beseitigung von Krankheitserregern bei, verursachen jedoch auch oxidative Modifikationen in Wirtsgeweben. Die MPO-Aktivität ist mit folgenden Zuständen verbunden:
- Entzündungskrankheiten: wie Atherosklerose, bei der MPO-modifiziertes LDL die Endotheldysfunktion und Plaquebildung fördert.
- Oxidativ stressbedingte Gewebeschäden.
- Potentieller Biomarker: für kardiovaskuläres Risiko und therapeutisches Ziel.
MPO-Assay-Kits ermöglichen eine präzise Quantifizierung der MPO-Aktivität, eines wichtigen Enzyms, das den Zusammenhang zwischen Immunmetabolismus und oxidativem Stress vermittelt. Ihre Anwendung fördert das Verständnis der Rolle von MPO in Gesundheit und Krankheit, insbesondere bei Entzündungen und vaskulärer Pathologie.