dATP (2'-Desoxyadenosin-5'-triphosphat) ist ein Purin-Desoxyribonukleotid und einer der vier grundlegenden Bausteine, die für die DNA-Synthese erforderlich sind. Es besteht aus der Nukleobase Adenin, die an einen Desoxyribose-Zucker und eine Kette von drei Phosphatgruppen an der 5'-Position gebunden ist. Während der DNA-Replikation wird dATP von DNA-Polymerasen in wachsende DNA-Stränge eingebaut, wobei es spezifisch mit Thymidin (dTTP) über komplementäre Basenpaarung paart. Als essenzieller zellulärer Metabolit ist dATP in einer Vielzahl von Organismen konserviert, von Bakterien bis zu Säugetieren.
Biologische Funktionen und Regulierung
dATP dient als primärer Adenin-Nukleotid-Donor während der DNA-Replikation und -Reparatur. Es wird intrazellulär aus Adenosindiphosphat (ADP) über eng regulierte enzymatische Wege synthetisiert, die ausgeglichene Desoxynukleotid-Pools aufrechterhalten. In der Molekularbiologie ist dATP eine unverzichtbare Komponente der PCR, DNA-Sequenzierung, molekularen Klonierung und zahlreicher enzymatischer DNA-Amplifikationstechniken. Eine hohe Reagenzreinheit ist entscheidend, da Verunreinigungen wie modifizierte Nukleotide oder Pyrophosphat DNA-Polymerasen hemmen und die Amplifikationseffizienz beeinträchtigen können, insbesondere bei Echtzeit-PCR- und Langstrecken-PCR-Anwendungen. Standard-PCR-Reaktionen verwenden in der Regel eine Endkonzentration von etwa 0,2 mM für jedes Desoxynukleotid.
Forschungsanwendungen und Vorteile
- DNA-Synthese: Liefert das Adenin-Nukleotid, das für DNA-Replikation, -Reparatur und enzymatische Amplifikationsreaktionen erforderlich ist.
- Molekularbiologische Arbeitsabläufe: Wird weitverbreitet in PCR, quantitativer PCR, DNA-Sequenzierung, Klonierung und anderen Nukleinsäure-Amplifikationstechniken verwendet, die hochreine Nukleotide erfordern.
- Markierung mit modifizierten Nukleotiden: Funktionalisierte Derivate wie Biotin-11-dATP ermöglichen die nicht-radioaktive Markierung von DNA-Sonden für Anwendungen wie Fluoreszenz-in-situ-Hybridisierung (FISH), Southern Blotting und Streptavidin-basierte Nachweissysteme.
- Hochwertige Formulierungen: Erhältlich in hochgereinigten (≥99%) 10 mM- und 100 mM-Lösungen, um reproduzierbare Leistung und langfristige Stabilität bei Lagerung bei -20 °C zu gewährleisten.